惊艳！核酸提取还能用这种方法？

莺歌燕舞

想象一下，在短短7分钟内就能完成核酸的提取，而这，正是英国科学家们肯尼·马尔帕蒂达-卡德纳斯、杰克·鲍姆、奥布里·坎宁顿、一 潘特利斯·乔治乌和耶稣罗德里格斯-曼萨诺共同研发的革命性技术。他们利用纸质干血斑，开创了一种快速、简便的核酸提取方法，彻底颠覆了传统繁琐的检测流程。
这项技术不仅主打速度，更在准确性和便捷性上大放异彩。利用NASBA技术进行验证，这种方法不仅能应用于细胞和病毒研究，还能将提取的核酸迅速应用于侧向层析和比色法中。这对于急需快速检测结果的分子诊断产品来说，无疑是一场革命。
POC（即时检测）对快速检测的高需求，使得从纤维素滤纸（DBSFP）开发快速提取核酸方法变得迫切。这种新方法必须满足四个关键要求：与恒温化学反应相容，如环介导的等温扩增（LAMP），以简化硬件需求；独立于实验室设备，适应资源有限的环境；价格合理，与广泛可用的分子试剂兼容，以降低成本并提高通量；在室温条件下保持稳定，告别冷链储存的繁琐。
为了满足这些要求，科学家们进行了深入研究，最终开发出了一种基于纸张的核酸提取方法。这种方法无需电力，仅需在室温下进行，依赖于用表面活性剂igepal预处理的纤维素滤纸。令人惊叹的是，整个过程仅需不到7分钟，就能获得高质量的核酸。
这项技术的问世，不仅为科研领域带来了极大便利，更为医疗、生物安全等领域开辟了新的可能性。想象一下，在未来，我们或许能够在几分钟内完成核酸检测，无需复杂的设备和繁琐的流程。这将极大地提高检测效率，降低交叉感染的风险，为我们的生活带来更多的安全和便捷。
一、滤纸处理buffer液和滤纸的预处理
1、将剂在无酶水中稀释，终浓度为 2%、4%、6%、8% 和 10%（ w/v 或 v/v）。用 150 μL 的每种溶液点样评估的滤纸，覆盖直径为 3 cm 的圆形表面积，并在室温下干燥过夜。
本实验所用到的试剂，均可从上海前迪生物科技有限公司提供

编号	名称	货号	规格	备注
1	无酶水	KD-W100	100ml	规格可选
2	滤纸处理buffer液	KD-W-B100	100ml	规格可选
3	滤纸	KD-P001	/
4	1×PBS	KD-W-W100	/	规格可选,特殊处理，非常规PBS
5	1×TE溶液	KD-W-T100	100ml	规格可选,特殊处理，非常规TE

2、优化纸基核酸提取方法的实验条件
核酸提取的执行方式如下：（i）在预处理或未处理的滤纸上滴加全血，并放置干燥过夜；（ii） 取出直径为3 mm的放有全血的圆型滤纸片;将滤纸片沉积到 1.5 mL 或 2.0 mL Eppendorf 管中；（iii） 用 1× PBS 通过摇晃、涡旋或被动（不受干扰）进行洗涤。在不同的条件下评估三种洗涤类型：洗涤次数（1、2 或 3）、洗涤时间（20 s、30 s 或 60 s）和 洗涤液的体积（400 μL、600 μL 或 1500 μL）;（iv）从洗涤步骤中丢弃PBS后，用1× TE缓冲液，以不同体积（40 μL、80 μL或150 μL）、孵育不同时间（3、5或8 min）和不同温度（RT、63 °C或95 °C）进行核酸洗脱;（v） 最后，将获得的核酸加入到扩增体系中进行扩增。具体的流程可仔细阅读下图：


让我们共同期待这一技术的广泛应用，它将为我们带来更多的惊喜和可能性！

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